培养基保存于 4 ℃ 冰箱中，培养基内的CO₂ 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性，而培养基中的酸碱指示剂 (通常为 phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏紫色。培养基偏碱的结果， 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤 CO₂，以调整 pH 值。