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四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒说明书
2011-03-14  来源:北京华安麦科生物技术有限公司



四环素类(TCs)ELISA检测试剂盒:

四环素检测试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。四环素检测试剂盒可定性、定量检测,本试剂盒适用于蜂蜜、牛奶、组织(含水产)中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素等四环素类药物的残留检测。

一、概要

四环素类药物(Tetracyclines,TCs)是以四并苯为母核的一族抗生素,其中四环素、土霉素、金霉素及多西环素以其优良的抗菌性、稳定的药性及低廉的价格,在畜牧业生产中广泛用于疾病的治疗和预防及促进生长。但该类药物过量使用会导致畜产品中高浓度药物残留,直接影响消费者身体健康。

高效液相色谱法目前是分析四环素类药物残留量的主要方法,但需要一系列繁琐的提取和净化处理步骤,而且存在回收率低,杂质干扰大等问题。



二、试验原理

四环素检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被四环素类药物抗原,样本残留的四环素类药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗四环素类药物抗体,加入酶标二抗,经TMB底物显色,样本吸光度值与其残留物四环素类药物呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中四环素类药物的含量。



三、交叉反应率

四环素…………………………………………………100%

强力霉素…………………………………………………100%

金霉素……………………………………………………60%

土霉素………………………………………………………80%



四、检测方法灵敏度、准确度、精密度

试剂盒灵敏度:0.05ppb

样本最低检测限:

蜂蜜………………………………………………………3ppb

牛奶………………………………………………………5ppb

组织(含水产)……………………………………………3ppb

回收率:

蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±15%

组织(含水产)…………………………………………75±15%

精密度:试剂盒的变异系数均小于10%



五、注意事项

1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、每加一种试剂前需将其摇匀。

4、反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6、储存条件

保存试剂盒于2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。

7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到30min(或更长)。反之,则减短反应时间。

9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。

10、该试剂盒最佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。



六、贮藏条件及保存期

贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。

保存期:该产品有效期为12个月。

 

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